用于高保真热启动 PCR 和微生物组应用的Ultra-Clean Production预混液

特征

使用ultra clean, DNA-depleted reagents消除残留的 DNA 和背景噪音
在较宽的GC含量范围内获得可靠、稳健的结果，无抑制剂效应
超快的 PCR，保真度比 Taq 高 70 倍
优越的特异性和灵敏度：抗体介导的聚合酶和外切酶热启动
可视化移液控制和凝胶跟踪染料监测成功程序
自动化就绪：稳定的室温反应装置

产品详情

UCP HiFidelity PCR 试剂盒为需要使用任何 DNA 或 cDNA 模板具有低 PCR 错误率的高灵敏度和特异性热启动 PCR 提供了一种方便的格式。

专用工艺可实现这种预混料的超清洁生产。这些过程会耗尽潜在的背景DNA，以提供最干净的样品。结合卓越的抑制剂耐药性和最小的GC含量偏倚，该试剂盒是微生物组应用（如16S或18S扩增）的理想选择。与Taq聚合酶相比，其保真度提高了70倍，因此在克隆，扩增子测序或基因组编辑实验分析期间可以根据需要实现无差错扩增。其他功能包括可视化移液控制、快速循环方案、反应设置期间和之后的室温稳定性以及扩增长扩增子的能力。

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性能

超洁净生产过程与核酸消耗相结合，确保将表达宿主或其他来源的残留DNA的潜在污染降至最低。所有组分均采用 16S 和 18S rRNA 编码序列的通用 PCR 检测法测试细菌和真菌 DNA。这有助于在微生物检测，质量控制程序或微生物组/宏基因组分析和测序中获得准确的结果。特别是低生物量样品测试受益于超洁净试剂，并具有改进的抑制剂耐受性和最小的GC含量偏差，可确保准确的结果。
该酶的校对功能提供了显着改进的保真度，比与之相比的标准Taq聚合酶高70倍。
聚合酶活性和外切酶活性均由特异性抗体严格控制，从而防止在反应设置过程中模板和引物的过早活性或损伤以及非特异性退火。该试剂盒可产生钝性最终产品，非常适合需要高保真 PCR 的程序，如克隆、位点定向诱变、重叠延伸 PCR 或基因编辑实验分析。
低度多路复用和扩增高达10 kb的长靶标的能力也使其成为扩增子测序分析的完美选择。室温设置、集成的视觉移液和凝胶上样染料进一步提高了基因分型和基因检测工作流程的效率。

原则

UCP HiFidelity PCR 试剂盒提供方便的即用型预混液配方和 UCP PCR 水。它还在单独的小瓶中包含橙色UCP预混血迹追踪器和蓝色UCP模板示踪剂，以供可选使用（参见：“UCP HiFidelity PCR试剂盒”）。该酶的校对功能提供了显着改进的保真度，与标准Taq聚合酶相比，保真度提高了70倍。聚合酶活性和外切酶活性均由特异性抗体严格控制，从而防止在反应设置过程中模板和引物的过早活性或损伤以及非特异性退火。在低温下，酶的聚合酶和外切酶活性保持在非活性状态，从而在环境温度下阻止任何酶活性，直到98°C的热活化。

UCP 模板示踪剂和 UCP 混合预混示踪剂中的蓝色和橙色染料分别允许在 PCR 设置期间对移液样品进行目视跟踪，以防止错误。将蓝色模板添加到橙色PCR预混液中时，颜色变为绿色，确认样品已添加（参见：“可视移液对照”）。这些示踪剂的使用是可选的。

循环后，反应可直接上样到琼脂糖凝胶上。每种示踪染料都可以监控加载过程并有效跟踪随后的电泳。钝端PCR产物非常适合各种克隆或基因编辑应用。

程序

UCP 多重试剂盒提供方便的即用型 2 倍浓缩预混液配方。
橙色预混液示踪剂可选择加入预混液或PCR缓冲液中。当用蓝色模板示踪剂染色的模板加入到预混液中时，溶液的颜色从橙色变为绿色，提供正确移液和反应设置的视觉指示。示踪剂允许在PCR后直接上样在琼脂糖凝胶上，并有效地跟踪随后的电泳。染料在1%琼脂糖凝胶上以约50 bp（橙色）和4000 bp（蓝色）运行。

多功能缓冲液系统可在不到1小时的时间内实现超快PCR，而无需优化或更换缓冲液成分。该试剂盒还提供了用于扩增长模板或低度多重PCR的实验方案。

为了进一步简化 PCR 工作流程，我们建议使用 QIAgility 仪器进行自动反应设置，并在 QIAxcel 系统上进行 PCR 分析。对于微生物组分析，QIAGEN提供一系列专用产品，包括用于样品提取的DNeasy Power Soil Pro试剂盒，用于下一代测序的QIAseq 16S面板或用于生物信息分析的CLC Microbial Genomics Pro Suite软件。

应用

UCP HiFidelity PCR 试剂盒非常适合需要高纯度和准确性的程序，如微生物检测、微生物组/宏基因组分析和测序、质量控制、基因分型和基因编辑。该试剂盒可产生钝端产品，非常适合需要高保真 PCR 的程序，例如克隆或位点定向诱变。低度多路复用和扩增高达10 kb的长靶标的能力也使其成为扩增子测序分析的完美选择。抑制剂的高稳健性甚至允许从血液中直接进行PCR。