从植物和真菌中纯化总RNA

Features

30分钟即可获得高品质的总RNA

无需酚/氯仿抽提

无需CsCl梯度离心，无需LiCl或乙醇沉淀

出色的RNA回收率

即用型RNA适合多种下游应用

Product Details

RNeasy Plant Mini Kit含QIAshredder离心柱和RNeasy离心柱，前者用于匀质化和过滤高粘度的植物或真菌的裂解物，后者使用硅胶膜技术纯化至多100 μg高品质RNA。纯化过程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动化进行。该试剂盒也可配合TissueRuptor或TissueLyser体系使用，高效破碎并匀质化植物样本。

Performance

RNeasy Plant Mini Kit适用于从各种植物和真菌样本中纯化总RNA，样本为10–100 mg的组织或100–1 x 107个细胞。离心柱的结合能力达100 µg RNA。100 mg植物组织的常规产量是25–65 µg RNA，但样本不同的发育阶段和生长条件可能导致不同的RNA产量。

RNeasy Plant Mini Kit 处理的样本

植物 丝状真菌

Anemone sp.

Arabidopsis thaliana1

Begonia sp.

Beta vulgaris (甜菜)2

Chlamydomonas reinhardii (单细胞藻类)

Chrysanthemum

Clarkia spp.3

Daucus carota (胡萝卜t)4

Diascia sp.

Dendranthema sp.

Euglena gracilis (单细胞藻类)

Funaria hygrometrica (苔)

Hordeum vulgare (大麦)

Lycopersicon esculentum (西红柿)5

Malus sp. (苹果)6

Nicotiana tabacum (烟草)

Oryza sativa (米)

Pelargonium sp. (天竺葵)

Petroselinum crispum (香菜)7

Pisum sativum (豌豆)

Prunus sp. (樱桃)6

Ranunculus sp.

Ribes nigrum (红醋栗)

Riccia fluitans (苔)

Sinapis arvensis (芥末)

Solanum tuberosum (土豆)8

Spinacia oleracea (菠菜)

Surfinia sp.

Triticum aestivum (小麦)

Vitis sp. (葡萄藤)6

Zea mays (玉米) Acremonium crysogenum9

Fusarium avenaceum9

Young leaves or needles, except as indicated: 1 Flowers, buds, siliques, roots; 2 roots; 3 petals, stamen, stigma, sepals, style; 4 cultured cells; 5 mature flower, expanded leaves, shoot tip, stem, green fruit; 6 budwood; 7 seedlings; 8 dormant tuber; 9 mycelium

100 mg组织的产量

样本类型 产量

拟南芥叶 35 µg

玉米叶 25 µg

番茄叶 65 µg

烟草叶 60 µg

纯化的植物RNA，包含病毒RNA，洗脱体积30–100 µl。多聚糖等污染物被除去，洗脱得到的RNA适用于多种下游应用。

Principle

RNeasy Plant Mini Kit提供QIAshredder离心柱用于匀质化和通过离心法过滤高粘度的植物或真菌裂解物，同时采用 RNeasy Mini离心柱对RNA进行纯化。RNeasy纯化技术整合了异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度，简化了总RNA纯化技术。RNeasy试剂盒提供高品质的RNA，DNA污染达到最低水平。对微量DNA非常敏感的RNA应用，可在RNeasy操作流程中进行方便的柱上DNase处理，去除残留的DNA。

Procedure

样本首先被裂解，并在QIAshredder离心柱中匀质化。在裂解液中加入乙醇以提供合适的结合条件。将裂解液上样到RNeasy硅胶膜上，RNA与硅胶膜结合，各种污染物被高效洗去。浓缩的纯RNA被水洗脱。

Applications

RNeasy技术纯化得到的高品质RNA适合各种下游应用，包括：

Northern印迹、点印迹和狭缝印迹

终点式RT-PCR

定量real-time RT-PCR

芯片分析

Poly A+ RNA筛选

Supporting data and figures

RNeasy Plant Mini procedure.