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DNase I(RNase free)
货号:S8136 | 规格:2KU | 价格:¥0.00 | 品牌:BMASSAY
DNase I(RNase free)可用于降解单链或双链DNA,用于无DNA污染的RNA的制备,逆转录及体外转录等实验.

脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ)是一种非特异性核酸酶切酶,大多数来源于重组E.coli菌株,含有牛胰腺DNaseⅠ的MBP融合克隆,DNaseⅠ可用于降解单链或双链DNA,其原理为DNaseⅠ水解磷酸二酯键产生带有5'-磷酸基团和3'-OH的单核苷酸或寡核苷酸。Mg2+或Mn2+都可以激活DNase I 的活性,而Ca2+浓度直接影响酶的活性;Mg2+存在时可在双链DNA的每条单链上随机产生切口;而在Mn2+存在下可使双链DNA断裂,使DNA片段化。

DNaseⅠ(RNase free)由DNaseⅠ、酶保护液、防腐剂等组成,浓度为2000U/ml,不含RNase,用于单链DNA、双链DNA、染色质、RNA:DNA杂交链,该试剂多用于无DNA污染的RNA的制备,逆转录及体外转录等实验。



储存条件: -20℃



用途:制备不含DNA的RNA样品;PCR反应前RNA样品中去除基因组DNA等可能的DNA污染;体外T7, T3, SP6等RNA  Polymerases催化的RNA转录后去除DNA模板;DNase I footprinting研究DNA-蛋白质相互作用;缺口平移(nick translatioin);产生DNA随机片段文库;细胞凋亡TUNEL检测中部分剪切基因组DNA作为阳性对照。



操作步骤(仅供参考):

1、取DNase I(RNase free)平衡至室温,低速离心,使液体沉至管底待用,根据不同实验,应加入适量的酶,以便充分消化DNA,一般1U酶可消化小于1μg的DNA。

2、取DNase I(RNase free) 2 ~ 5μl(即 4 ~ 10U) , 加入 10xDNase Buffer 10ul 以及待处理液(一般小于4~10μg),最后用去离子水或RNase-Free ddH2O补至100μl。

3、25~37℃孵育10min。

4、灭活条件:75℃孵育10min。



注意事项:

1、应注意避免污染和反复冻融。

2、1单位是指在50ul反应体系中,37℃条件下,10min能完全降解1ug pBR322DNA所需的酶量。

3、该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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